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膠原抗體誘導小鼠關(guān)節(jié)炎模型之CAIA實驗方案

更新時間：2023-08-16   點擊次數(shù)：392次

PROTOCOL TO INDUCE CAIA

CAIA實驗方案


Chondrex公司 / 欣博盛生物建議尾靜脈注射單克隆抗體合劑。對于易感品系，可采用腹腔注射，但是通過腹腔注射CAIA誘發(fā)的炎癥嚴重程度往往較低，關(guān)節(jié)炎持續(xù)時間也較短。請根據(jù)實驗目的選擇合適的實驗方案。

Catalog NumberAmount
53100100mg
5304040mg
53010


A. Inducing CAIA without LPS

膠原抗體誘導的關(guān)節(jié)炎


在易感品系DBA/1和Balb/c小鼠中采用CAIA建立關(guān)節(jié)炎模型，根據(jù)動物供應商，動物周齡和體積大小的不同，每只小鼠需注射6-10mg單克隆抗體合劑。例如，初次注射免疫5mg抗體合劑后24小時再次注射5mg抗體合劑。關(guān)節(jié)炎會在二次免疫后的24-48小時后發(fā)生。研究員需要根據(jù)實驗目的調(diào)整實驗方案。


B. Inducing CAIA with LPS 

膠原抗體聯(lián)用LPS誘導的關(guān)節(jié)炎


細菌毒素LPS（B細胞分裂素）， MAM(支原體產(chǎn)生的T細胞分裂素)或SEB(金黃色葡萄球菌產(chǎn)生的T 細胞分裂素)和膠原抗體在誘發(fā)關(guān)節(jié)炎中具有協(xié)同效應。在這些毒素的存在下，誘導關(guān)節(jié)炎的抗體合劑的量可降低。例如，每只小鼠初次免疫注射1.5mg抗體合劑后第三天注射25-50µgLPS，對于易感品系小鼠（Balb/c, DBA/1,B10.RIII, and C.B-17 scid/scid mice），關(guān)節(jié)炎的發(fā)生率高達100%。在C57BL/6小鼠尾部靜脈注射5mg抗體合劑，關(guān)節(jié)炎在初次免疫后第7-10天達到最嚴重， 可維持兩周。在初次免疫第10或14天注射25-50µgLPS, 關(guān)節(jié)炎會持續(xù)惡化。盡管三周后炎癥反應有所緩解，關(guān)節(jié)破壞是永-久性的，甚至導致關(guān)節(jié)強直。


EVALUATING ARTHRITIS

關(guān)節(jié)炎評估


關(guān)節(jié)炎可通過臨床評分來定性評估或用測厚儀來測量爪子厚度來評估。由于小鼠的爪子太小，因此無法像測量大鼠爪子體積那樣通過浸沒法測定小鼠爪子體積。

Chondrex公司提供以下評分系統(tǒng)（表二）


表二 關(guān)節(jié)炎炎癥程度的臨床評分

得分發(fā)病情況
0Normal 正常
1Mild, but definite redness and swelling of the ankle or wrist, or apparent redness and swelling limited to individual digits, regardless of the number of affected digits 

輕度的、踝關(guān)節(jié)、腕關(guān)節(jié)發(fā)紅、腫脹

2Moderate redness and swelling of ankle or wrist 踝關(guān)節(jié)或腕關(guān)節(jié)中度發(fā)紅腫脹
3Severe redness and swelling of the entire paw

including digits

爪子嚴重發(fā)紅、腫脹，包括指端

4Maximally inflamed limb involving multiple joints 四肢最-大-程-度發(fā)炎，包括多關(guān)節(jié)


表三 成功阻斷單克隆抗體誘發(fā)的關(guān)節(jié)炎的藥物

膠原抗體誘導小鼠關(guān)節(jié)炎模型之CAIA實驗方案



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